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病理技術經驗分享之切片

發表時間:2023-02-20 17:26
石蠟切片的操作流程

石蠟組織切片:病理組織經取材、固定、脫水處理,用石蠟包埋后制成蠟塊,用切片機制作切片的過程。


1. 開啟冷臺與烤片機電源,設置溫度;

2. 攤片機注入雙蒸水,開機,設置溫度;

3. 冷凍蠟塊至適宜切片的溫度;

4. 將蠟塊固定至石蠟切片機上,粗修至適宜切面;

5. 細修至切面平整,切片;

6. 展片、撈片;

7. 卸下蠟塊,核對切片號碼與蠟塊號碼的一致性;

8. 豎直瀝干切片中的水分,烤片。


石蠟切片規范性操作注意要點

切片前準備

攤片機溫度設置在45-50℃,切片容易展開,蠟不會快速溶解散開為宜;烤片機溫度設置在70℃左右;固定切片機刀座、安裝刀片,注意檢查切片角度、切片厚度。

蠟塊冷凍

蠟塊冷凍溫度不宜過低。

修片與切片

粗修組織注意組織的切面與層次,保證組織的完整性;粗修注意修片厚度與修片速度,避免粗修造成組織撕裂與崩缺;切片前注意細修切片,去除粗修時造成的組織裂隙;切片厚度一般為4μm,淋巴結2-3μm,腎穿與骨髓穿刺組織1-2μm,腦組織4-5μm;切片時注意速度適中,過慢與過快易造成切片厚薄不均或切片厚度不準;切片要求完整、均勻、厚度適宜。

展片與撈片

展片前注意清除液面表面上一例切片的殘留碎屑;展片的平整性與組織的完整性;撈片時注意讓組織處于載玻片的適當位置;撈片數量:大組織撈1片,小組織撈6-8片。

烤片

烤片前注意瀝干切片上的水分;

烤片溫度不宜過高,溫度高于蠟熔點的5-10℃,時間以烤干水分為宜。

切片結束

卸下刀片,清潔切片機、設備儀器與操作臺面;

整理蠟塊、切片染色。


切片常見原因及分析

一、切片太厚

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二、切片空洞

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三、切片刀痕

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四、切片太顫抖

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五、切片褶皺

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六、切片氣泡

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七、切片跳片

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如何獲得優質石蠟切片

適宜的工作場所

? 穩定的試驗臺,沒有顫抖晃動,遠離風口,空調口,門口等;

? 最好是高度可調的符合人體工程學的桌椅;

? 切片機之間要有一定的距離,要有相配套的設備如攤烤片機,技術員之間不能相互干擾;

? 防滑地面以便清掃和保證人員安全。

安全操作

高質量的刀片,并且注意定期更換刀片

技術人員擁有良好工作習慣,良好的使用習慣能確保刀片最長使用壽命

? 批量修片,認真仔細粗修、細修,防止組織從包埋盒上脫落。

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修片速度太快,修好以后沒有細修導致裂隙的產生


? 不要使用硬的物體接觸刀片,如鑷子,刷子。

? 切片刀刃傾斜過大或過小都不能正常進行切片。

? 有系統的使用刀片,從一邊順序使用到另外一邊。

? 精準的刀架側向移動功能,確保刀片全長使用。

? 確保蠟塊的溫度是冷的,或者使用冷臺, 防止過度冷凍組織塊。

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? 攤片機的水溫設置合適:45℃左右。

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? 烤片機的烤片溫度設置:65℃左右。

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? 切片速度控制,通常的規律是手輪完成一周的旋轉約耗時一秒鐘。

? 每次使用后必須對切片機進行   清潔與保養。

1) 鎖定手輪;

2) 從刀架上卸下刀具,進行清洗;

3) 使用一把干燥的刷子清除切片廢屑;

4) 向前拉動切片廢屑盤,根據各自具體的實驗室規定對切片廢屑進行處置;

5) 使用除蠟劑將刀架進行徹底清潔。


? 切片機的定期維護

1) 為了確保切片質量和切片機的功能不受影響,建議由受過培訓的維修技術人員每年對切片機進行一次例行維護。

2) 電池在使用5年之后,應由維修技術人員進行更換。

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切片質量問題和整體解決方案

問題

原因

解決方案

切片厚薄不一

刀片不鋒利;

刀角不理想;

樣本夾和/或刀架未充分夾緊。

更換新刀片或更換刀片品牌;

調整刀角;

重新擰緊樣本夾和刀架。

切片有壓縮

刀片不鋒利;

樣本過熱;

不理想的間隙角;

切片速度過快。

更換新刀片或更換刀片品牌;

重新冷卻樣本;

調整刀角;

減慢旋轉手輪的速度。

切片上出現“顫痕”

切片速度過快;

不理想的間隙角;

樣本夾和/或刀架未充分夾緊。

減慢旋轉手輪的速度。

調整刀角;

重新擰緊樣本夾和刀架。

切片過程中,手輪過緊或局部過緊

切片機刀架連接處蠟垢太多;

切片機與底板之間存在蠟碎屑與切片廢屑。

清除切片廢屑并清潔切片機;

聯系設備維修工程師。




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