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【1001問】問題253:傳統的蘇丹Ⅲ染色效果不甚理想，有沒有改良的更好的方法？

發表時間：2023-02-20 17:26

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傳統的蘇丹Ⅲ染色效果不甚理想，有沒有改良的更好的方法？
蘇丹Ⅲ是脂溶性染料在冰凍切片內脂質的溶解度較原有溶劑的溶解度更大，所以染色時染料就從有機溶劑轉移入脂質而使脂肪顯色。常規蘇丹Ⅲ染色法所用蘇丹Ⅲ劑量為0.15g，如果將其增加至0.5g，提高其濃度，可使脂肪更快著色從原來需時30分鐘縮短為1～2分鐘，大大節約了染色時間，提高工作效率。常規用漂浮法操作起來不易掌握，如采用直接貼在玻片上染色易掌握，方便快速，染色效果好，色彩艷麗。另外，改良法染色時間短，浸染、滴染均可，而常規法必須用浸染否則由于染色時間長切片上易出現染料結晶影響觀察。
注意事項：
1.固定可以防止細胞內脂質的彌散，要用4%中性甲醛固定，不能用含乙醇、有機溶劑的固定液。
2.固定的時間視標本的種類而定。
3.經實踐發現，脂肪瘤、脂肪肉瘤的標本不論固定多少天都可切片不會掉片，而含實質細胞較多的標本 （如肝、腎等）固定時間應<2天，否則很容易掉片固定過的標本冰凍時間應延長至10分鐘。
4.脂肪瘤等含脂肪成分多的標本溫度應<-35℃脂肪肉瘤及其他組織溫度在-25℃左右即可。
5.切片厚度對脂肪染色也至關重要，太薄脂滴會被切破不顯色；太厚易脫片。本法建議切片厚12～18μm既能完整地顯示脂質又不至于脫片。
由于脂肪細胞內的脂滴呈懸浮狀游離于細胞內所以封固時脂滴容易移位建議封固時切片不要太干燥，不要用吸水紙吸液或用鑷子壓迫玻片趕氣泡以免脂滴移位影響觀察。

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