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【1001問】問題252:有報道鋨酸脂肪染色有了新的改進方法,如何操作?

發表時間:2023-02-17 17:23

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有報道鋨酸脂肪染色有了新的改進方法,如何操作?
鋨酸亦稱四氧化鋨,是一種金屬氧化物,為無色結晶體,價格昂貴。市售包裝有0.5g和1g等,均以玻璃管密封。鋨酸染色法是一種古老的染色方法,常用于診斷脂肪栓塞、脂肪心、脂肪肝等疾病,特別適用于經過甲醛固定的病理組織。與其他蘇丹類的脂肪染色方法相比,鋨酸染色法效果好,且能長期保存,適用于法醫辦案工作,尤其是案件以后的復查;其缺點是費用較高,其方法如下:
1.組織處理:
組織取材厚度為0.2~0.3cm固定于 (1%鋨酸液10ml+1%鉻酸液25ml+冰醋酸5ml+蒸餾水60ml)固定液中,組織游離于上述固定液內,固定36~72小時,中途更換新液1~2次。經固定后脂肪組織被氧化成黑色體,不會被脂溶劑溶解。脫水、透明流水輕微沖洗組織塊6~12小時后,60%、80%、95%、無水乙醇脫水,二甲苯透明。浸蠟、包埋、切片,浸蠟溫度以56~58℃為宜,切片厚5~6μm。
2.染色方法:
①切片脫蠟后HE復染。
②經乙醇脫水、二甲苯透明。
③以中性樹膠封周。
3.結果判定:
鋨酸染色法主要顯示組織內脂肪黑色 。
4.注意事項:
①用鋨酸浸泡固定的組織在切片后如不復染,則背景細胞模糊,組織結構不清,難于判斷組織來源。進行HE復染后,不僅能清楚地顯示脂肪的存在及其形態,其背景組織細胞也鮮艷清晰。
②在進行鋨酸配制時,細心將原裝玻璃管用水洗凈,再用乙醇沖洗1次,最后用蒸餾水洗滌多次,連同玻璃管投進棕色砂塞瓶中,用一以濾紙包裹的金屬棒輕輕地把玻璃管擊破,然后加蒸餾水,塞緊瓶蓋后輕輕搖動使其溶解,即放入冰箱保存待用。
③鋨酸盡量不接觸皮膚,并注意避免濺入眼睛以免引起結膜炎
④鋨酸必須用有色玻璃瓶密封,放于冷暗處,一般配制2%的溶液備用,不能久存,以現用現配為好。

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