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【1001問】問題246:神經膠質纖維最常用的是Holzer磷鉬酸結晶紫染色法,但據說染色效果不佳,有沒有更好的方法?

發表時間:2023-02-07 10:32

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神經膠質纖維最常用的是Holzer磷鉬酸結晶紫染色法,但據說染色效果不佳,有沒有更好的方法?
在神經系統腫瘤中,神經膠質細胞瘤發生頻率最高,故神經膠質細胞Holzer磷鉬酸結晶紫染色是最常用的方法之一,適用于神經膠質瘤的診斷與鑒別診斷。但在實際工作中此法染色確實結果不佳,解決之道是加入一些預處理過程 (高錳酸鉀、草酸),便可以取得較好的效果,現介紹如下:
1.組織處理:
10%甲醛溶液固定,石蠟包埋,切片厚8~10μm。
2.操作方法:
(1)切片常規脫蠟入水。
(2)0.3%高錳酸鉀水溶液處理10分鐘。
(3)水洗后1%草酸水溶液處理1分鐘。
(4) 蒸餾水洗。
(5)用磷鉬酸溶液處理3~5分鐘。
(6)直接用乙醇氯仿溶液滴于切片上,使切片全部呈灰白色為止。
(7)切片保持濕潤,直接滴加結晶紫染液染色20~30分鐘
(8)用10%溴化鉀水溶液滴于切片上,呈金黃色為止。
(9)將切片上的溶液用濾紙吸干。
(10)苯胺溶液分化。鏡下觀察控制。
(11)分化適當后急速用二甲苯清洗2次。
(12)二甲苯透明,樹膠封固。
3.結果判定:

神經膠質纖維呈濃黑色且染色均勻,背景未見共染現象,神經膠質纖維與背景對比鮮明。且結果穩定,便于觀察。


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